dna变性的原因?pcr需要注意的问题

生活常识 2023-05-08 13:15生活常识www.pifubingw.cn

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什么是dna变性,dna变性后理化性质有何变化

DNA变性是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂,双链变成单链,从而使核酸的天然构象和性质发生改变。变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂,碱基间的堆积力遭到破坏,但不涉及到其一级结构的改变。凡能破坏双螺旋稳定性的因素,如加热、极端的pH、有机试剂甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等,均可引起核酸分子变性。 变性DNA常发生一些理化及生物学性质的改变 1)溶液粘度降低。DNA双螺旋是紧密的刚性结构,变性后代之以柔软而松散的无规则单股线性结构,DNA粘度而明显下降。 2)溶液旋光性发生改变。变性后整个DNA分子的对称性及分子局部的构性改变,使DNA溶液的旋光性发生变化。 3)增色效应(hyperchromic effect)。指变性后DNA溶液的紫外吸收作用增强的效应。DNA分子中碱基间电子的相互作用使DNA分子具有吸收260nm波长紫外光的特性。在DNA双螺旋结构中碱基藏入内侧,变性时DNA双螺旋解开,于是碱基外露,碱基中电子的相互作用更有利于紫外吸收,故而产生增色效应。

DNA变性后理化性质有何变化

您好!DNA变性后,由于维持DNA二级结构的氢键断裂,由双链变为单链,导致 ① 溶液粘度降低双链结构分子量大且相互缠绕,流体阻力大,断裂成单链后阻力小,粘度变小。 ② 溶液旋光性发生改变变性后整个DNA分子的对称性及分子局部的构性改变,使DNA溶液的旋光性发生变化。 ③ 紫外吸收作用增强由于双螺旋结构的破坏导致碱基的充分暴露,表现为OD260光吸收增大。 百度教育团队【海纳百川团】为您解答。 感谢您的采纳 O(∩_∩)O 。如有疑问,欢迎追问。

什么是DNA变性?变性后DNA理化性质有哪些改变

DNA变性是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂,双链变成单链,从而使核酸的天然构象和性质发生改变。变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂,碱基间的堆积力遭到破坏,但不涉及到其一级结构的改变。凡能破坏双螺旋稳定性的因素,如加热、极端的pH、有机试剂甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等,均可引起核酸分子变性。 变性DNA常发生一些理化及生物学性质的改变 1)溶液粘度降低。DNA双螺旋是紧密的刚性结构,变性后代之以柔软而松散的无规则单股线性结构,DNA粘度而明显下降。 2)溶液旋光性发生改变。变性后整个DNA分子的对称性及分子局部的构性改变,使DNA溶液的旋光性发生变化。 3)增色效应(hyperchromic effect)。指变性后DNA溶液的紫外吸收作用增强的效应。DNA分子中碱基间电子的相互作用使DNA分子具有吸收260nm波长紫外光的特性。在DNA双螺旋结构中碱基藏入内侧,变性时DNA双螺旋解开,于是碱基外露,碱基中电子的相互作用更有利于紫外吸收,故而产生增色效应。

为什么DNA分子越大越容易分离?

般情况选择94℃30s使各种复杂dna完全变性 基于PCR原理三步骤设置变性-退火-延伸三温度点.标准反应采用三温度点,双链DNA90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合靶序列,快速升温至70~75℃,Taq DNA 聚合酶作用,使引物链沿模板延伸.于较短靶基(度100~300bp)采用二温度点, 除变性温度外、退火与延伸温度合二,般采用94℃变性,65℃左右退火与延伸(温度Taq DNA酶仍较高催化性). 1. 变性温度与间变性温度低,解链完全导致PCR失败主要原.DNA其链解温度变性需几秒钟,反应管内达Tss需定间,变性温度太高影响酶性;通情况93℃~94℃1min足使模板DNA变性,若低于93℃则需延间,温度能高,高温环境酶性影响.变性所需加热温度取决于模板及PCR产物双链DNAG+C含量.双链DNAG+C比率越高,则双链DNA离变性温度越高.变性所需间与DNA度相关,DNA越,特定变性温度使双链DNA完全离所需间越.若变性温度太低或变性间太短,则能使DNA模板富含AT区域产变性,PCR循环反应温度降低,部变性DNA模板重新结合双链DNA,导致PCR失败.

高温条件下为什么还能用dna鉴别死者 dna不是变性了吗

DNA变性的条件是高温,温度是八九十度,一般的环境不会有那么高的,DNA暴露在外界主要不是受温度影响降解变性,主要是受酶的影响降解掉。

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